¡Solución innovadora de diagnóstico de TB y DR-TB de #Macro & Micro-Test!

Una nueva arma para el diagnóstico de la tuberculosis y la detección de la resistencia a los medicamentos: una secuenciación dirigida de nueva generación (tNGS) combinada con el aprendizaje automático para el diagnóstico de la hipersensibilidad a la tuberculosis

Informe bibliográfico: CCa: un modelo de diagnóstico basado en tNGS y aprendizaje automático, adecuado para personas con tuberculosis y meningitis tuberculosa menos bacterianas.

Título de la tesis: Secuenciación de próxima generación y aprendizaje automático dirigido a la tuberculosis: una estrategia de diagnóstico ultrasensible para los túbulos pulmonares paucíficos y la meningitis tubular.

Periódico: 《Clínica Chimica Acta》

SI: 6,5

Fecha de publicación: enero de 2024

En combinación con la Academia de Ciencias de la Universidad de China y el Hospital de Tórax de Beijing de la Universidad Médica Capital, Macro & Micro-Test estableció un modelo de diagnóstico de tuberculosis basado en la nueva generación de tecnología de secuenciación dirigida (tNGS) y método de aprendizaje automático, que proporcionó datos ultraaltos. sensibilidad de detección de tuberculosis con pocas bacterias y meningitis tuberculosa, proporcionó un nuevo método de diagnóstico de hipersensibilidad para el diagnóstico clínico de dos tipos de tuberculosis y ayudó al diagnóstico preciso, la detección de resistencia a los medicamentos y el tratamiento de la tuberculosis.Al mismo tiempo, se descubre que el ADNcf plasmático del paciente se puede utilizar como un tipo de muestra adecuado para el muestreo clínico en el diagnóstico de TBM.

En este estudio, se utilizaron 227 muestras de plasma y muestras de líquido cefalorraquídeo para establecer dos cohortes clínicas, en las que las muestras de la cohorte de diagnóstico de laboratorio se utilizaron para establecer el modelo de aprendizaje automático del diagnóstico de tuberculosis, y las muestras de la cohorte de diagnóstico clínico se utilizaron para verificar lo establecido. modelo de diagnóstico.Todas las muestras fueron seleccionadas primero por un conjunto de sondas de captura dirigidas especialmente diseñadas para Mycobacterium tuberculosis.Luego, basándose en los datos de secuenciación de TB-tNGS, se utiliza el modelo de árbol de decisión para realizar una validación cruzada quíntuple en los conjuntos de entrenamiento y validación de la cola de diagnóstico de laboratorio, y se obtienen los umbrales de diagnóstico de muestras de plasma y muestras de líquido cefalorraquídeo.El umbral obtenido se coloca en dos conjuntos de pruebas de la cola de diagnóstico clínico para su detección, y el rendimiento diagnóstico del alumno se evalúa mediante la curva ROC.Finalmente se obtuvo el modelo de diagnóstico de tuberculosis.

Fig. 1 diagrama esquemático del diseño de investigación.

Resultados: De acuerdo con los umbrales específicos de la muestra de ADN de LCR (AUC = 0,974) y la muestra de ADNcf de plasma (AUC = 0,908) determinados en este estudio, entre 227 muestras, la sensibilidad de la muestra de LCR fue del 97,01%, la especificidad fue del 95,65% y la sensibilidad y especificidad de la muestra de plasma fueron 82,61% y 86,36%.En el análisis de 44 muestras pareadas de ADNcf de plasma y ADN de líquido cefalorraquídeo de pacientes con TBM, la estrategia de diagnóstico de este estudio tiene una alta consistencia del 90,91% (40/44) en ADNcf de plasma y ADN de líquido cefalorraquídeo, y la sensibilidad es de 95,45%. (42/44).En niños con tuberculosis pulmonar, la estrategia diagnóstica de este estudio es más sensible a muestras de plasma que los resultados de detección Xpert de muestras de jugo gástrico de los mismos pacientes (28,57% VS 15,38%).

Fig. 2 Rendimiento del análisis del modelo de diagnóstico de tuberculosis para muestras de población.

Fig. 3 Resultados de diagnóstico de muestras pareadas.

Conclusión: En este estudio se estableció un método de diagnóstico hipersensible para la tuberculosis, que puede proporcionar una herramienta de diagnóstico con la mayor sensibilidad de detección para pacientes clínicos con tuberculosis oligobacilar (cultivo negativo).La detección de tuberculosis hipersensible basada en el ADNcf plasmático puede ser un tipo de muestra adecuado para el diagnóstico de tuberculosis activa y meningitis tuberculosa (las muestras de plasma son más fáciles de recolectar que el líquido cefalorraquídeo para pacientes con sospecha de tuberculosis cerebral).

Enlace original: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/s0009898123004990?vía%3Dihub

Breve introducción de los productos de detección de la serie de tuberculosis Macro y Micro-Test

En vista de la complicada situación de las muestras de pacientes con tuberculosis y las diversas necesidades, Macro & Micro-Test proporciona un conjunto completo de soluciones NGS para la extracción por licuefacción de muestras de esputo, la construcción y secuenciación de bibliotecas de Qualcomm y el análisis de datos.Los productos cubren el diagnóstico rápido de pacientes con tuberculosis, la detección de resistencia a los medicamentos de la tuberculosis, la tipificación de Mycobacterium tuberculosis y NTM, el diagnóstico de hipersensibilidad de la tuberculosis bacteriana negativa y las personas con tuberculosis, etc.

Kits seriados de detección de tuberculosis y micobacterias:

Artículo No nombre del producto contenido de prueba del producto tipo de ejemplo modelo aplicable
HWTS-3012 Agente de liberación de muestra Utilizado en el tratamiento de licuefacción de muestras de esputo, ha obtenido un número récord de primera clase, Sutong Machinery Equipment 20230047. esputo
HWTS-NGS-P00021 Kit de detección de cantidad de Qualcomm para tuberculosis hipersensible (método de captura con sonda) Detección de hipersensibilidad no invasiva (biopsia líquida) para tuberculosis pulmonar y nódulos cerebrales con bacterias negativas;Las muestras de personas sospechosas de estar infectadas con tuberculosis o micobacterias no tuberculosas se analizaron mediante metagenómica de secuenciación de alta profundidad, y la información de detección de si estaban infectadas con tuberculosis o micobacterias no tuberculosas y la principal información de resistencia a los medicamentos de primera línea de Mycobacterium tuberculosis. Fueron proveidos. Sangre periférica, líquido de lavado alveolar, hidrotórax y ascitis, muestra de punción del foco, líquido cefalorraquídeo. Segunda generación
HWTS-NGS-T001 Kit de tipificación de micobacterias y detección de resistencia a medicamentos (método de secuenciación por amplificación múltiple) Prueba de tipificación de Mycobacterium, incluidos MTBC y 187 NTMLa detección de la resistencia a los medicamentos de Mycobacterium tuberculosis cubre 13 medicamentos y 16 sitios de mutación centrales de genes de resistencia a los medicamentos. Esputo, líquido de lavado alveolar, hidrotórax y ascitis, muestra de punción del foco, líquido cefalorraquídeo. Plataforma dual de segunda/tercera generación

Aspectos destacados: HWTS-NGS-T001 Kit de detección de resistencia a medicamentos y tipificación de micobacterias (método de amplificación múltiple)

Introducción del producto

El producto se basa en los principales medicamentos de primera y segunda línea descritos en las pautas de tratamiento de la tuberculosis de la OMS, macrólidos y aminoglucósidos comúnmente utilizados en las pautas de tratamiento de NTM, y los sitios de resistencia a los medicamentos cubren todo un grupo de sitios relacionados con la resistencia a los medicamentos en el Catálogo de mutaciones del complejo Mycobacterium tuberculosis de la OMS, así como otros genes de resistencia a los medicamentos y sitios de mutación informados de acuerdo con la investigación y estadísticas de literatura de alta puntuación en el país y en el extranjero.

La identificación por tipificación se basa en las cepas de NTM resumidas en las pautas de NTM publicadas por el Chinese Journal of Tuberculosis and Respiratory Diseases y en el consenso de expertos.Los cebadores de tipificación diseñados pueden amplificar, secuenciar y anotar más de 190 especies de NTM.

Mediante la tecnología de amplificación por PCR múltiplex dirigida, los genes de genotipado y los genes resistentes a los medicamentos de Mycobacterium se amplificaron mediante PCR múltiplex y se obtuvo la combinación de amplicones de genes diana a detectar.Los productos amplificados se pueden construir en bibliotecas de secuenciación de alto rendimiento de segunda o tercera generación, y todas las plataformas de secuenciación de segunda y tercera generación se pueden someter a una secuenciación de alta profundidad para obtener la información de secuencia de los genes diana.Al compararlas con las mutaciones conocidas contenidas en la base de datos de referencia incorporada (incluido el catálogo de mutaciones del complejo Mycobacterium tuberculosis de la OMS y su relación con la resistencia a los medicamentos), se determinaron las mutaciones relacionadas con la resistencia a los medicamentos o la susceptibilidad a los medicamentos antituberculosos.Combinado con la solución de tratamiento de muestras de esputo de apertura automática de Macro & Micro-Test, se resolvió el problema de la baja eficiencia de amplificación de ácido nucleico de las muestras de esputo clínicas (diez veces mayor que la de los métodos tradicionales), de modo que se puede detectar la secuenciación de la resistencia a los medicamentos. aplicado directamente a muestras clínicas de esputo.

Rango de detección del producto

34genes relacionados con la resistencia a los medicamentos de18medicamentos antituberculosos y6Se detectaron drogas MNT, que abarcan297sitios de resistencia a los medicamentos;Diez tipos de Mycobacterium tuberculosis y más de190Se detectaron tipos de MNA.

Tabla 1: Información de 18+6 Medicamentos +190+NTM

Ventaja del producto

Fuerte adaptabilidad clínica: las muestras de esputo se pueden detectar directamente con un agente de autolicuefacción sin cultivo.

La operación experimental es simple: la primera ronda de operación de amplificación es simple y la construcción de la biblioteca se completa en 3 horas, lo que mejora la eficiencia del trabajo.

Tipificación integral y resistencia a los medicamentos: cubre los sitios de tipificación y resistencia a los medicamentos de MTB y NTM, que son los puntos clave de preocupación clínica, tipificación precisa y detección de resistencia a los medicamentos, admite software de análisis independiente y genera informes de análisis con un solo clic.

Compatibilidad: compatibilidad del producto, adaptación a las principales plataformas ILM y MGI/ONT.

Especificaciones del producto

Código de producto nombre del producto Plataforma de detección especificaciones
HWTS-NGS-T001 Kit de tipificación de micobacterias y detección de resistencia a medicamentos (método de amplificación múltiple) ONT、Illumina、MGI、Salus pro 16/96rxn

Hora de publicación: 23 de enero de 2024