¡Solución de diagnóstico innovador de TB y DR -TB por #macro & micro -test!

Una nueva arma para el diagnóstico de tuberculosis y la detección de resistencia a los medicamentos: una secuenciación dirigida a la nueva generación (TNG) combinada con el aprendizaje automático para el diagnóstico de hipersensibilidad de tuberculosis

Informe de literatura: CCA: un modelo de diagnóstico basado en TNG y aprendizaje automático, que es adecuado para personas con menos tuberculosis bacteriana y meningitis tuberculosa.

Título de la tesis: secuenciación y aprendizaje automático de la próxima generación dirigida a tuberculos: una estrategia de diagnóstico ultra sensible para tubularios pulmonares y meningitis tubular.

Periódico: 《clínica chimica acta》

Si : 6.5

Fecha de publicación: enero de 2024

Combinado con la Universidad de la Academia de Ciencias de China y el Hospital Beijing Chest del Capital Medical University, Macro & Micro-Test estableció un modelo de diagnóstico de tuberculosis basado en la nueva generación de tecnología de secuenciación específica (TNG) y un método de aprendizaje automático, que proporcionó un ultra alto contenido. La sensibilidad a la detección de la tuberculosis con pocas bacterias y meningitis tuberculosa proporcionó un nuevo método de diagnóstico de hipersensibilidad para la clínica Diagnóstico de dos tipos de tuberculosis y ayudó al diagnóstico preciso, la detección de resistencia a los medicamentos y el tratamiento de la tuberculosis. Al mismo tiempo, se encuentra que el ADNc en plasma del paciente puede usarse como un tipo de muestra adecuado para el muestreo clínico en el diagnóstico de TBM.

En este estudio, se utilizaron 227 muestras plasmáticas y muestras de líquido cefalorraquídeo para establecer dos cohortes clínicas, en las que se usaron muestras de cohorte de diagnóstico de laboratorio para establecer el modelo de aprendizaje automático del diagnóstico de tuberculosis, y las muestras de cohorte de diagnóstico clínico para verificar el establecido modelo de diagnóstico. Todas las muestras fueron atacadas primero por un grupo de sondas de captura dirigido especialmente diseñado para Mycobacterium tuberculosis. Luego, según los datos de secuenciación de TB-TNGS, el modelo de árbol de decisión se utiliza para realizar una validación transversal 5 veces en los conjuntos de entrenamiento y validación de la cola de diagnóstico de laboratorio, y se obtienen los umbrales de diagnóstico de muestras plasmáticas y muestras de líquidos cerebroespinales. El umbral obtenido se lleva a dos conjuntos de pruebas de la cola de diagnóstico clínico para la detección, y el rendimiento diagnóstico del alumno es evaluado por ROC Curve. Finalmente, se obtuvo el modelo de diagnóstico de tuberculosis.

Fig. 1 Diagrama esquemático de diseño de investigación

Resultados: De acuerdo con los umbrales específicos de la muestra de ADN de LCR (AUC = 0.974) y la muestra de ADNc en plasma (AUC = 0.908) determinado en este estudio, entre 227 muestras, la sensibilidad de la muestra de LCR fue del 97.01%, la especificidad fue del 95.65%, y La sensibilidad y la especificidad de la muestra de plasma fueron 82.61% y 86.36%. En el análisis de 44 muestras emparejadas de ADN en plasma y ADN de líquido cefalorraquídeo de pacientes con TBM, la estrategia de diagnóstico de este estudio tiene una alta consistencia de 90.91% (40/44) en ADN en plasma y ADN de líquido cefalorraquídeo, y la sensibilidad es 95.45% (42/44). En niños con tuberculosis pulmonar, la estrategia de diagnóstico de este estudio es más sensible a las muestras de plasma que los resultados de detección de Xpert de muestras de jugo gástrico de los mismos pacientes (28.57% frente a 15.38%).

Fig. 2 Análisis rendimiento del modelo de diagnóstico de tuberculosis para muestras de población

Fig. 3 Resultados de diagnóstico de muestras emparejadas

Conclusión: en este estudio se estableció un método de diagnóstico hipersensible para la tuberculosis, que puede proporcionar una herramienta de diagnóstico con la mayor sensibilidad de detección para pacientes clínicos con tuberculosis oligobacilar (cultivo negativo). La detección de tuberculosis hipersensible basada en el ADNc en plasma puede ser un tipo de muestra adecuado para el diagnóstico de tuberculosis activa y meningitis tuberculosa (las muestras plasmáticas son más fáciles de recolectar que el líquido cefalorraquídeo para pacientes sospechosos de tuberculosis cerebral).

Enlace original: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/s0009898123004990? a través de%3dihub

Breve introducción de productos de detección de la serie Macro & Micro-Test Tuberculosis

En vista de la complicada situación de muestra de los pacientes con tuberculosis y diversas necesidades, la macro y micro-prueba proporciona un conjunto completo de soluciones NGS para la extracción de licuefacción de muestras de esputo, construcción y secuenciación de la biblioteca Qualcomm, y análisis de datos. Los productos cubren el diagnóstico rápido de pacientes con tuberculosis, detección de resistencia a los medicamentos de tuberculosis, tipificación de micobacterium tuberculosis y NTM, diagnóstico de hipersensibilidad de tuberculosis bacterianas y personas tuberculosas, etc.

Kits de detección en serie para tuberculosis y micobacterias:

Artículo no nombre del producto Contenido de prueba de productos tipo de muestra modelo aplicable
HWTS-3012 Agente de lanzamiento de muestra Utilizado en el tratamiento de licuefacción de muestras de esputo, ha obtenido un número de registro de primera clase, Sutong Machinery Equipment 20230047. esputo
HWTS-NGS-P00021 Kit de detección de cantidad Qualcomm para tuberculosis hipersensible (método de captura de sonda) Detección de hipersensibilidad no invasiva (biopsia líquida) para la tuberculosis pulmonar bacteria negativa y los nódulos cerebrales; Las muestras de personas sospechosas de estar infectadas con tuberculosis o micobacterias no tuberculosis se analizaron mediante metagenómica de secuenciación de alta profundidad, y la información de detección de si se infectó la información de la tucobacteria de tucobacterias de tucobacterias de tucobacteria de la tucobacteria. fueron proporcionados. Sangre periférica, líquido de lavado alveolar, hidrotorax y ascitis, muestra de punción de enfoque, líquido cefalorraquídeo. Segunda generación
HWTS-NGS-T001 Mycobacterium tipificación y kit de detección de resistencia a los medicamentos (método de secuenciación de amplificación multiplex) Prueba de tipificación de Mycobacterium, incluyendo MTBC y 187 NTMLa detección de resistencia a los medicamentos de Mycobacterium tuberculosis cubre 13 fármacos y 16 sitios de mutación núcleo de genes de resistencia a los medicamentos. Esputo, líquido de lavado alveolar, hidrotorax y ascitis, muestra de punción de enfoque, líquido cefalorraquídeo. Plataforma dual de segunda/tercera generación

Destacados: HWTS-NGS-T001 Mycobacterium Typing y Kit de detección de resistencia a los medicamentos (método de amplificación de multiplex)

Introducción al producto

El producto se basa en los principales medicamentos de primera y segunda línea descritos en las pautas de tratamiento de la TB, los macrólidos y los aminoglucósidos comúnmente utilizados en las pautas de tratamiento de NTM, y los sitios de resistencia a los medicamentos cubren todos los sitios relacionados con la resistencia a los medicamentos en los La OMS CATÁLOGO DE MUTACIÓN COMPLEJO DE MYCOBacterium tuberculosis, así como otros genes de resistencia a los medicamentos y los sitios de mutación de acuerdo con la investigación y las estadísticas de Literatura de alta puntuación en el hogar y en el extranjero.

La identificación de tipificación se basa en las cepas NTM resumidas en las pautas de NTM publicadas por China Journal of Tuberculosis y Enfermedades respiratorias y el consenso de los expertos. Los cebadores de escritura diseñados pueden amplificar, secuenciar y anotar más de 190 especies NTM.

A través de la tecnología de amplificación de PCR multiplex dirigida, los genes de genotipado y los genes resistentes a los fármacos de Mycobacterium se amplificaron por PCR multiplex, y se obtuvo la combinación de amplicones de genes diana que se detectaron. Los productos amplificados se pueden construir en bibliotecas de secuenciación de alto rendimiento de segunda generación o de tercera generación, y todas las plataformas de secuenciación de segunda generación y tercera generación pueden someterse a una secuencia de alta profundidad para obtener la información de secuencia de los genes objetivo. Al compararse con las mutaciones conocidas contenidas en la base de datos de referencia incorporada (incluida la OMS Mycobacterium Tuberculosis Complex Mutation Catálogo y su relación con la resistencia a los medicamentos), se determinaron las mutaciones relacionadas con la resistencia a los medicamentos o la susceptibilidad de los fármacos anti-tuberculosis. Combinado con la solución de tratamiento de muestra de esputo autoapsulada de macro y micro-prueba, se resolvió el problema de la eficiencia de amplificación de ácido nucleico de baja nucleico de las muestras de esputo clínico (diez veces más alto que el de los métodos tradicionales), por lo que se puede resolver la detección de la secuencia de resistencia a los fármacos aplicado directamente a muestras de esputo clínicas.

Gama de detección de productos

34genes relacionados con la resistencia a los medicamentos de18drogas anti-tuberculosis y6Se detectaron drogas NTM, cubriendo297Sitios de resistencia a las drogas; Diez tipos de micobacterium tuberculosis y más que190Se detectaron tipos de NTM.

Tabla 1: Información de 18+6 Drogas+190+NTM

Ventaja del producto

Fuerte adaptabilidad clínica: las muestras de esputo se pueden detectar directamente con el agente de auto-liga sin cultivo.

La operación experimental es simple: la primera ronda de operación de amplificación es simple y la construcción de la biblioteca se completa en 3 horas, lo que mejora la eficiencia laboral.

Tipo integral y resistencia a los medicamentos: cubriendo los sitios de tipificación y resistencia a los medicamentos de MTB y NTM, que son los puntos clave de preocupación clínica, tipificación precisa y detección de resistencia a los medicamentos, respaldo del software de análisis independiente y la generación de informes de análisis con un clic.

Compatibilidad: compatibilidad del producto, adaptación a las plataformas ILM y MGI/ONT convencionales.

Especificación de producto

Código de producto nombre del producto Plataforma de detección presupuesto
HWTS-NGS-T001 Kit de tipificación de Mycobacterium y detección de resistencia a los medicamentos (método de amplificación multiplex) Ont 、 Illumina 、 MGI 、 Salus Pro 16/96RXN

Tiempo de publicación: enero 23-2024