Gen de resistencia a carbapenémicos (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Nombre del producto
HWTS-OT045 Kit de detección del gen de resistencia a carbapenémicos (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (PCR de fluorescencia)
Epidemiología
Los antibióticos carbapenémicos son antibióticos β-lactámicos atípicos con el espectro antibacteriano más amplio y la actividad antibacteriana más potente.Debido a su estabilidad frente a las β-lactamasas y su baja toxicidad, se ha convertido en uno de los fármacos antibacterianos más importantes para el tratamiento de infecciones bacterianas graves.Los carbapenémicos son muy estables frente a las β-lactamasas de espectro extendido (BLEE) mediadas por plásmidos, los cromosomas y las cefalosporinasas mediadas por plásmidos (enzimas AmpC).
Canal
Mezcla PCR 1 | Mezcla PCR 2 | |
familia | DIABLILLO | EMPUJE |
VIC/HEXAGONAL | Control interno | Control interno |
CY5 | NDM | Cuerpo de Protección de Kosovo |
ROX | OXA48
| OXA23 |
Parámetros técnicos
Almacenamiento | ≤-18 ℃ |
Duración | 12 meses |
Tipo de muestra | Esputo, colonias puras, hisopo rectal |
Ct | ≤36 |
CV | ≤5,0% |
LoD | 103UFC/mL |
Especificidad | a) El kit detecta las referencias negativas estandarizadas de la empresa y los resultados cumplen con los requisitos de las referencias correspondientes. b) Los resultados de la prueba de reactividad cruzada muestran que este kit no tiene reacción cruzada con otros patógenos respiratorios, como Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter. junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, Adenovirus respiratorio, Enterococcus o muestras que contengan otros genes resistentes a medicamentos CTX, mecA, SME, SHV, TEM, etc. c) Antiinterferencias: para la prueba de interferencia se seleccionan mucina, minociclina, gentamicina, clindamicina, imipenem, cefoperazona, meropenem, clorhidrato de ciprofloxacina, levofloxacina, ácido clavulánico y roxitromicina, y los resultados muestran que las sustancias que interfieren antes mencionadas no tienen ninguna reacción de interferencia. para la detección de genes de resistencia a carbapenémicos KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM e IMP. |
Instrumentos aplicables | Sistemas de PCR en tiempo real Applied Biosystems 7500 Sistemas de PCR en tiempo real QuantStudio®5 Sistemas de PCR en tiempo real SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Sistema de PCR en tiempo real LightCycler®480 Sistema de detección de PCR en tiempo real LineGene 9600 Plus (FQD-96A,Hangzhoutecnología biológica) Ciclador térmico cuantitativo en tiempo real MA-6000 (Suzhou Molarray Co., Ltd.) Sistema de PCR en tiempo real BioRad CFX96 Sistema de PCR en tiempo real BioRad CFX Opus 96 |
Flujo de trabajo
Opción 1.
Reactivo de extracción recomendado: Kit general de ADN/ARN para macro y microprueba (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, TANDAS-3019-48, HWTS-3019-96) (que se puede utilizar con el extractor automático de ácidos nucleicos Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) de Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Agregue 200 μl de solución salina normal a el talo precipita.Los pasos posteriores deben seguir las instrucciones de extracción y el volumen de elución recomendado es100μL.
Opcion 2.
Reactivo de extracción recomendado: Reactivo de purificación o extracción de ácido nucleico (YDP302) de Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. La extracción debe iniciarse estrictamente de acuerdo con el paso 2 de las instrucciones de uso (agregue 200 μL de tampón GA al precipitado del talo , y agitar hasta que el talo esté completamente suspendido).Utilice agua libre de RNasa/DNasa para la elución; el volumen de elución recomendado es de 100 μl.
Opción 3.
Reactivo de extracción recomendado: Reactivo de liberación de muestras para macro y microprueba.La muestra de esputo debe lavarse añadiendo 1 ml de solución salina normal al precipitado de talo tratado mencionado anteriormente, centrifugarse a 13.000 r/min durante 5 minutos y desechar el sobrenadante (conserve entre 10 y 20 µl de sobrenadante).Para colonias puras y hisopos rectales, agregue 50 μl de reactivo de liberación de muestra directamente al precipitado de talo tratado mencionado anteriormente y los pasos posteriores se deben extraer de acuerdo con las instrucciones de uso.