Gen de resistencia a carbapenémicos (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Nombre del producto
Kit de detección del gen de resistencia a carbapenémicos HWTS-OT045 (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (PCR de fluorescencia)
Epidemiología
Los antibióticos carbapenémicos son β-lactámicos atípicos con el espectro antibacteriano más amplio y la actividad antibacteriana más potente. Gracias a su estabilidad a las β-lactamasas y su baja toxicidad, se han convertido en uno de los fármacos antibacterianos más importantes para el tratamiento de infecciones bacterianas graves. Los carbapenémicos son altamente estables a las β-lactamasas de espectro extendido (BLEE) mediadas por plásmidos, a los cromosomas y a las cefalosporinasas mediadas por plásmidos (enzimas AmpC).
Canal
| Mezcla PCR 1 | Mezcla PCR 2 | |
| FAM | DIABLILLO | EMPUJE |
| VIC/HEX | Control interno | Control interno |
| Año 5 | NDM | Cuerpo de Protección de Kosovo |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Parámetros técnicos
| Almacenamiento | ≤-18℃ |
| Duración | 12 meses |
| Tipo de muestra | Esputo, colonias puras, hisopado rectal |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | 103UFC/ml |
| Especificidad | a) El kit detecta las referencias negativas estandarizadas de la empresa, y los resultados cumplen los requisitos de las referencias correspondientes. b) Los resultados de la prueba de reactividad cruzada muestran que este kit no tiene reacción cruzada con otros patógenos respiratorios, como Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, adenovirus respiratorio, Enterococcus, o muestras que contienen otros genes resistentes a fármacos CTX, mecA, SME, SHV, TEM, etc. c) Antiinterferencia: Se seleccionaron mucina, minociclina, gentamicina, clindamicina, imipenem, cefoperazona, meropenem, clorhidrato de ciprofloxacino, levofloxacino, ácido clavulánico y roxitromicina para la prueba de interferencia, y los resultados muestran que las sustancias interferentes mencionadas anteriormente no tienen reacción de interferencia para la detección de los genes de resistencia a carbapenémicos KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM e IMP. |
| Instrumentos aplicables | Sistemas de PCR en tiempo real Applied Biosystems 7500 Sistemas de PCR en tiempo real QuantStudio®5 Sistemas de PCR en tiempo real SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Sistema de PCR en tiempo real LightCycler®480 Sistema de detección de PCR en tiempo real LineGene 9600 Plus (FQD-96A，HangzhouTecnología Bioer) Ciclador térmico cuantitativo en tiempo real MA-6000 (Suzhou Molarray Co., Ltd.) Sistema de PCR en tiempo real BioRad CFX96 Sistema de PCR en tiempo real BioRad CFX Opus 96 |
Flujo de trabajo
Opción 1.
Reactivo de extracción recomendado: Kit general de ADN/ARN Macro & Micro-Test (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (que se puede utilizar con el extractor automático de ácidos nucleicos Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B) de Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.). Añada 200 μL de solución salina normal al precipitado del talo. Los pasos posteriores deben seguir las instrucciones de extracción, y el volumen de elución recomendado es100 μL.
Opción 2.
Reactivo de extracción recomendado: Reactivo de Extracción o Purificación de Ácidos Nucleicos (YDP302) de Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. La extracción debe iniciarse siguiendo estrictamente el paso 2 de las instrucciones de uso (añadir 200 μL de tampón GA al precipitado del talo y agitar hasta que este se suspenda por completo). Utilizar agua libre de ARNasa/ADNasa para la elución; el volumen de elución recomendado es de 100 μL.
Opción 3.
Reactivo de extracción recomendado: Reactivo de liberación de muestras para macro y micropruebas. La muestra de esputo debe lavarse añadiendo 1 ml de solución salina normal al precipitado de talo tratado mencionado, centrifugarse a 13000 rpm durante 5 minutos y desecharse el sobrenadante (conservar entre 10 y 20 µL de sobrenadante). Para obtener colonias puras y muestras rectales, añadir 50 µL de reactivo de liberación de muestras directamente al precipitado de talo tratado mencionado y, a continuación, extraer según las instrucciones de uso.
